（支原体、衣原体、立克次体过滤不能除去）

2.2 病毒的分离与培养：

①实验动物

②鸡胚

③细胞培养→最常用于病毒分离培养的方法

（朊病毒，疯牛病目前无法培养）

2.2.1 动物接种：

①最原始方法

②分离和鉴定病毒

③增殖病毒以制备抗原和疫苗

④病毒实验研究

常用动物：本动物（马、牛、羊、猪、鸡、鸭、鹅） 小白鼠、豚鼠、家兔、鸽子

接种途径：

鼻腔内、皮内、皮下、腹腔、静脉、肌肉、脑内

（接种最多：肌肉、皮下、黏膜）

动物接种优点和缺点

优点：操作简便

缺点：

①动物体内存在特异性抗体

②动物体内带有病毒（可通过使用无菌动物解决）

2.2.2 鸡胚培养：

一般用 9~12 日龄鸡胚

①绒毛尿囊膜

②尿囊腔

③羊膜腔

④卵黄囊

⑤脑内

⑥静脉

很多哺乳类病毒不在鸡胚上生长（不适应）→牢记！！实验需掌握

鸡胚培养病毒的优点和缺点

优点：经济、简便、鸡胚易得

缺点：

①有些鸡胚带有母源抗体

②也可能带有病毒

③很多病毒在鸡胚中不生长

2.2.3 细胞培养：

①将离体活组织块或分流的活细胞加以培养统称为组织培养，后者又称单层细胞培养。

②细胞培养适于绝大多数病毒生长，是病毒实验室的常规技术。

细胞培养的特点：

（1）细胞的生理特性基本一致

（2）对病毒的感染性一致

（3）没有实验动物的个体差异

（4）重复性好

（5）与实验动物相比，通过观察细胞病变或结合免疫学技术检测判断结果。

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（6）可通过病毒细胞培养产生的空斑进行克隆纯化病毒。

细胞培养的类型

根据细胞的来源、染色体特征及传代次数，可分为三种类型:

（1）原代细胞

（2）二倍体细胞株