1.病毒与细胞相互作用的类型
宿主细胞感染病毒发生的变化有杀细胞和非杀细胞两种。
①杀细胞:细胞病变、细胞裂解、细胞死亡。
②生产性:细胞存活、允许病毒繁殖、释放。
③非生产性:细胞存活、阻断病毒复制。
④转化:病毒基因与细胞基因整合可致肿瘤、细胞形态变化。
2.病毒引致的杀细胞变化
(1)细胞病变(CPE):
①在体外实验中通过细胞培养和接种杀细胞性病毒,经过一定时间后,可用显微镜观察到细胞变圆坏死,从瓶壁脱落等现象(杀细胞性病毒感染所致的细胞损伤)。
②CPE 可在光学显微镜下观察,是病毒学检测及研究常规手段之一。
③病毒产生 CPE 的能力与其对动物的致病力正相关
(2)研究 CPE 的作用:
①判定病毒的毒力(TCID50)
②检测、鉴定病毒
(3)CPE 的类型
CPE 的表现:细胞圆缩、肿大、形成合胞体或空泡等。
CPE 包括:
①涉及细胞膜的 CPE(细胞膜融合)。
②涉及细胞骨架的 CPE。
③病毒引致的细胞凋亡与坏死。
(4)几个概念:
①合胞体:
有些病毒能使感染的细胞膜发生改变,而导致感染细胞与邻近未感染细胞发生融合细胞融合的结果是形成多核巨细胞合胞体。
②细胞凋亡:
即程序性死亡,是细胞阻止病毒感染所采取的一种自杀行为。属单个细胞死亡,而不是大量细胞死亡。
3.空斑的形成:
(1)操作方法
(2)概念:
①空斑。
是细胞病变的一种特殊形式,也叫噬斑或蚀斑。
②病毒克隆:
一个空斑可能由一个以上病毒颗粒感染所致,因此将获得的单个空斑制成悬液,梯度稀释后再作空斑,最终可得只含一个病毒颗粒及其子代的空斑,这就是病毒克隆。
③空斑形成单位(PFU):
指病毒的定量单位,可滴定血清效价、测定干扰素活性。
(3)用途:
①纯化病毒
②对病毒进行计量和动态研究
(病毒目前只用蚀斑实验进行纯化)
4.病毒包涵体
①病毒在增殖的过程中,常使寄主细胞内形成一种蛋白质性质的病变结构,可通过固定染色而后在光学显微镜下检测。
②包涵体是某些病毒感染细胞产生的特征性的形态变化。因病毒的种类而异,可用于诊断